液氮罐在细胞培养过程中的使用

　　液氮罐在细胞培养过程中的使用

　　细胞培养的一般过程主要包括四个步骤:准备、材料提取、培养和冷冻复苏。为了保存细胞，尤其是不易获得的突变细胞或细胞株，应冷冻细胞。冷冻温度一般采用196℃液氮温度，将细胞收集到冷冻管中，加入含有保护剂(一般为二甲基亚或甘油)的培养基，冷却速度一定，后储存在液氮罐中。在低的温度下，细胞的保存时间几乎是无限的。

　　胚胎冷冻保存技术

　　胚胎冷冻保存技术是指利用低温保护剂在低温条件下保存胚胎的技术。这项技术是由于人工授精技术在20世纪下半叶的广泛应用而产生的。动物胚胎的冷冻保存原理是由于低温降低了胚胎内的变质反应速度。温度越低，胚胎保存时间越长。

　　目前研究了慢速冷冻、快速冷冻、一步冷冻、直接移植冷冻、玻璃化冷冻等多种胚胎冷冻保存方法。玻璃化冷冻法的步骤如下:

　　①在室温下将胚胎放入25%的玻璃溶液(VS液)中进行预处理15分钟。

　　②在高浓度(75%190%)的VS液中保存预处理后的胚胎20-40分钟。金凤液氮罐

　　③将经过两步抗冻处理的胚胎直接放入液氮中保存。金凤液氮罐

　　另外，菌种、疫苗、骨组织、精子等物质也可以用液氮罐保存，都能达到良好的长期储存效果。